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Optimisation du rendement d'extraction des huiles essentielles d'eucalyptus globulus et caractérisation physico-chimique.


par Nathan MPIANA
Université de Lubumbashi - Bachelier Ingénieur Civil Chimiste 2019
  

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2.2 Méthodes

2.2.1 Caractérisation des feuilles d'Eucalyptus

a) Taux d'humidité

La teneur en eau est déterminée par dessiccation d'un échantillon de 3 g à la température de 105

°C dans une étuve pendant 24 heures. Le taux d'humidité est défini comme étant la perte de poids subie lors de la dessiccation.

La détermination de la teneur en eau était faite par le calcul de la différence de poids avant et après la dessiccation selon l'équation 2.1 :

% H=

M2 - M0 M1 - M0

(2.1)

* 100

Avec :

% H : Taux d'humidité,

M0 : Poids de la capsule vide,

M1 : Poids de la capsule + échantillon avant dessiccation, et

M2 : Poids de la capsule + échantillon après dessiccation.

b) Teneur en cendre

Le principe a consisté en une minéralisation par calcination de l'échantillon à 600 °C dans un four à moufle pendant 5 heures. La perte de masse par combustion correspond à la quantité de la matière organique (Audige, 1978).

La détermination de la teneur en matière organique a été faite par le calcul de la différence de poids avant et après la carbonisation. La teneur en matière organique a été donnée par l'équation 2.2

29 | P a g e

% C??ndr?? =

M2 - M0 M1 - M0

(2.2)

Avec :

% Cendre : Teneur en cendre,

M0 : Masse en gramme de la capsule vide,

M1 : Poids de la capsule et de l'échantillon avant incinération, et

M2 : Poids de la capsule et de l'échantillon après incinération.

2.2.1.1 Analyse phytochimique

Avant de mettre en évidence les principes actifs se trouvant au sein de la plante d'Eucalyptus, les extraits aqueux et Méthanolique ont été préparés pour les tests ultérieurs :

a) extrait aqueux : 50 g de matériel végétal ont été mis en contact avec 300 ml d'eau dans un ballon monocol surmonté d'un réfrigérant. L'ensemble a été porté à reflux pendant une heure. Le mélange a été filtré et l'extrait aqueux a été soumis aux différents tests.

b) extrait Méthanolique : La plante pulvérisée en poudre (50 g), a subi une macération dans un mélange des solvants : Méthanol / eau 80/20 (v/v) pendant 24 heures, puis on a filtré et ensuite on a recueilli le filtrat en suite on répète une seconde fois ce procédé. Les diverses fractions récupérées ont été réunies et évaporées sous pression réduite sur le rotavapeur à une température de 40 °C.

La mise en évidence des principes actifs, a consisté à la détection des flavonoïdes, tanins, stéroles, composés réducteurs, amidon, saponosides, au sein de l'échantillon d'Eucalyptus.

1. Flavonoïdes

La méthode de Utshudi et al., (2003) a été utilisée pour détecter les flavonoïdes présentes dans l'échantillon d'Eucalyptus. La réaction de détection des flavonoïdes a consisté à traiter 5 ml de l'extrait éthanolique avec 1 ml d'HCl concentré et 0,5 g de tournure (ou copeau) de magnésium. La présence des flavonoïdes a été mise en évidence avec l'apparition d'une couleur rose ou rouge se développe après 3 minutes.

30 | P a g e

Le changement de coloration :

? Virage au rouge (flavanones)

? Virage au rouge pourpre (flavonols)

? Rouge violacée (flavanones et flavonols)

2. Tanins

La présence des tanins est mise en évidence en ajoutant, à 1 ml de l'extrait éthanolique 2 ml d'eau et 2 à 3 gouttes de solution de FeCl3 diluée. Un test positif est révélé par l'apparition d'une coloration bleue-noire (tanins galliques), vert ou bleue-verte (tanins catéchiques). (Karumi et coll, 2004).

Stérols et stéroïdes

On a évaporé 2,5 ml d'extrait alcoolique, puis traiter le résidu obtenu avec 2,5 ml de Chloroforme anhydre. Ensuite on a mélangé 1,25 ml de la solution chloroformique avec 1,25 ml d'anhydre acétique et on y a ajouté quelques gouttes d'acide sulfurique concentré, ce mélange a été agité puis Laisser au repos, l'apparition d'une coloration violacée a été l'indicateur de la présence de stérols (Amini et al., 2010).

4. Composés réducteurs

Leur détection a consisté à traiter 1 ml de l'extrait éthanolique avec 2 ml d'eau distillée et 10 gouttes de la liqueur de Fehling, puis chauffer le mélange. Un test positif est révélé par la formation d'un précipité rouge brique (Dohou, 2015).

5. Amidon

On a Chauffé 5 ml de l'extrait aqueux avec 10 ml d'une solution de NaCl saturée dans un bain marie jusqu'à l'ébullition ; on y ajouter le réactif d'amidon eau iodée ou lugol. L'apparition d'une coloration bleue violacée a été l'indicateur la présence de l'amidon (Senhaji et al., 2005).

31 | P a g e

6. Saponosides

Les saponosides sont caractérisés par un l'indice de mousse. Leur détection est réalisée en ajoutant un peu d'eau à 2 ml de l'extrait aqueux, après l'agitation, le mélange est abandonné pendant 20 minutes et la teneur en saponosides est évaluée (Bruneton, 2009) :

? Apparition de la mousse = test positif ? Pas de mousse = test négatif

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