CHAPITRE 3 : RESULTATS ET DISCUSSION
3.1. Résultats et discussion
3.1.1. Préparation du plan de criblage
L'optimisation des conditions de culture pour obtenir une
meilleure production de la lipase à partir de la souche locale Cpt29, a
été mise au point à partir d'un plan de surface de
réponse (RSM). Cette étude d'optimisation utilisant une approche
chimiométrique a été élaborée après
une étape de criblage. Cette dernière étape nous a permis
de mettre en évidence les facteurs influents des conditions de cultures
qui mèneront à une meilleure production de la lipase. L'approche
statistique a été réalisée La démarche
expérimentale se présente comme suit :
? Détermination des facteurs et domaine
d'étude du plan de criblage
Afin de ressortir les facteurs de culture les plus influents,
nous avons décidé de faire appel dans un premier temps à
un plan de criblage. C'est un plan de premier degré utile pour
évaluer la pertinence d'un modèle de premier degré et
identifier les variables explicatives significatives qui permettent une
meilleure réponse. Pour cela nous avons choisi le plan de Plackett
-Burman en raison de son économie en termes de nombre d'essais. Dans
notre travail nous avons décidé de prendre en compte onze
facteurs potentiellement influents sur le cours de la production de la lipase.
Ces facteurs ainsi que le domaine de variation, sont précisés
dans le (tableau 6).
Tableau 6 : Facteurs et domaine d'étude
du plan de criblage.
|
Facteur
|
Unité
|
Niveau bas (-1)
|
Niveau haut (+1)
|
Symbole
|
|
Température
|
°C
|
40
|
50
|
X1
|
|
Temps
|
joures
|
2
|
5
|
X2
|
|
Ph
|
/
|
7
|
9
|
X3
|
|
Tween 80
|
%
|
2
|
4
|
X4
|
|
[FeSO4]
|
g/l
|
0,001
|
0,01
|
X5
|
|
[CaCl2]
|
g/l
|
0,01
|
1
|
X6
|
|
[NaCl]
|
g/l
|
3
|
4
|
X7
|
|
[MgSO4]
|
g/l
|
0,1
|
0,2
|
X8
|
|
[K2HPO4]
|
g/l
|
0,7
|
0,8
|
X9
|
|
[KH2PO4]
|
g/l
|
5
|
6
|
X10
|
|
[(NH2)4SO4]
|
g/l
|
1
|
1,5
|
X11
|
34
|
CHAPITRE 3 : RESULTATS ET DISCUSSION ? Construction du
plan de criblage et réalisation des essais
? Matrice des expériences
Afin de mieux cerner le problème nous fait varié
onze facteurs des paramètres expérimentaux de culture
(température, temps, pH, source de carbone (Tween80), [CaCl2], [MgSO4],
[K2HPO4], [KH2PO4], [NaCl], [(NH2)4SO4]). Le plan de Plackett-Burman pour onze
facteurs, comprend quinze essais, dont trois au centre du domaine. Il a
été l'aide du logiciel Minitab, version 16 (tableau
7).
Tableau 7 : Matrice des expériences du
plan de criblage.
|
|
|
[FeSO4],
réalisé à
|
|
|
Essai
|
X1
|
X2
|
X3
|
X4
|
X5
|
X6
|
X7
|
X8
|
X9
|
X10
|
X11
|
Activité (U/ml)
|
|
1
|
40
|
2,0
|
9
|
4
|
0,0100
|
0,010
|
4
|
0,3
|
0,7
|
7
|
0,5
|
48
|
|
2
|
50
|
5,0
|
9
|
2
|
0,0100
|
1,000
|
2
|
0,3
|
0,7
|
5
|
0,5
|
89
|
|
3
|
40
|
5,0
|
7
|
2
|
0,0010
|
1,000
|
4
|
0,3
|
0,7
|
7
|
1,5
|
21
|
|
4
|
50
|
5,0
|
7
|
4
|
0,0100
|
0,010
|
4
|
0,1
|
0,7
|
5
|
1,5
|
101
|
|
5
|
48
|
3,5
|
8
|
3
|
0,0055
|
0,505
|
3
|
0,2
|
0,8
|
6
|
1,0
|
121
|
|
6
|
50
|
2,0
|
9
|
2
|
0,0010
|
0,010
|
4
|
0,3
|
0,9
|
5
|
1,5
|
31
|
|
7
|
50
|
2,0
|
7
|
2
|
0,0100
|
1,000
|
4
|
0,1
|
0,9
|
7
|
0,5
|
29
|
|
8
|
40
|
2,0
|
7
|
2
|
0,0010
|
0,010
|
2
|
0,1
|
0,7
|
5
|
0,5
|
12
|
|
9
|
50
|
2,0
|
9
|
4
|
0,0010
|
1,000
|
2
|
0,1
|
0,7
|
7
|
1,5
|
59
|
|
10
|
45
|
3,5
|
8
|
3
|
0,0055
|
0,505
|
3
|
0,2
|
0,8
|
6
|
1,0
|
103
|
|
11
|
40
|
5,0
|
9
|
2
|
0,0100
|
0,010
|
2
|
0,1
|
0,9
|
7
|
1,5
|
41
|
|
12
|
40
|
2,0
|
7
|
4
|
0,0100
|
1,000
|
2
|
0,3
|
0,9
|
5
|
1,5
|
24
|
|
13
|
40
|
5,0
|
9
|
4
|
0,0010
|
1,000
|
4
|
0,1
|
0,9
|
5
|
0,5
|
64
|
|
14
|
45
|
3,5
|
8
|
3
|
0,0055
|
0,505
|
3
|
0,2
|
0,8
|
6
|
1,0
|
118
|
|
15
|
50
|
5,0
|
7
|
4
|
0,0010
|
0,010
|
2
|
0,3
|
0,9
|
7
|
0,5
|
93
|
|
|
|
35
|
|
|
