Optimisation des conditions de culture des lipases chez une souche bactérienne de type Actinomadura Keranitilytica par RSM

CHAPITRE 3. RESULTATS ET DISCUSSION

3.1. Résultats et discussion . 3.1.1 Préparation du plan de criblage 3.1.2 Résultats du plan de criblage et interprétation 3.1.3 Plan d'optimisation
	.

CONCLUSION GENERALE ..

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES

LISTE DES TABLEAUX

Tableau	Titre	Page
01	Classe Actinobacteria.	6
02	Habitats de certains actinomycètes.	10
03	Caractéristiques physico-chimique des microorganismes producteur des lipases	14
04	Micro-organismes producteurs de lipasess.	17
05	Aperçu des applications	18
06	Facteurs et domaines du plans de criblage	34
07	Matrice des expériences de criblage	35
08	Effet et coefficient estimés pour la réponse	36
09	Analyse de variance pour l'activité lipasique.	37
10	Facteurs et domaine d'élude du plan de Box-Behnken.	38
11	Plan de Box-Behnken et les résultas expérimentaux obtenus.	39
12	Coefficients estimés pour l'activité U/ml.	40
13	Analyse de variance pour l'activité U/ml.	40

LISTE DES FIGURES

Figure	Titre	Page
01	Observation au microscope électronique à balayage illustrant les types fragmentaire et permanent du mycélium des actinomycètes. (A) Bactéries du genre Nocardia en fragmentation, (B) Bactéries du genre Streptomyces en sporulation.	7
02	Cycle de développement des actinomycètes sur milieu solide .	9
03	Présentation de la réaction enzymatique, qui catalyse l'hydrolyse ou la synthèse de triglycéride.	13
04	Mécanisme d'intervention de la triade (Ser-Hist-Asp) et formation de l'acyl-enzyme.	15
05	pH-stat piloté par un micro ordinateur ( SI ANALYTICS Titroline^® 7000).	23
06	Aspect morphologique d'actinomycète thermophile strain cpt29.	24
07	La courbe y = f(x) .	26
08	L'établissement du plan d'expériences .	28
09	Graphique de comparaison de réponse mesurée et estimée.	30
10	Diagramme de Pareto des effets des variables explicatives.	37
11	Diagramme des réponses mesurées en fonction de celles estimées.	41
12	Diagrammes de contours présentant les effets des différents facteurs sur l'activité.	42
13	Optimisation de l'activité par la fonction Désirabilité.	43

II

Introduction

INTRODUCTION

Les enzymes sont des protéines qui allient la capacité de reconnaitre très spécifiquement des molécules au pouvoir de catalyser efficacement leur transformation en composées utiles au métabolisme des organismes vivants. Les réactions chimiques dans les systèmes biologiques se font rarement en l'absence d'enzymes et celles-ci ne favorisent pas seulement une réaction chimique donnée, elles empêchent aussi la présence de réactions secondaires gênantes. Une enzyme est une protéine, qui de par sa séquence et sa structure tertiaire ou quaternaire, possède la capacité d'interagir avec une autre molécule et de la modifier chimiquement.

C'est ainsi qu'au cours de ces dernières années, les enzymes se retrouvent dans de nombreux domaines : chimie fine, agro-alimentaire, secteur biomédical, etc. Pour cela beaucoup de recherches s'orientent maintenant vers l'étude de la spécificité et l'exploitation du potentiel synthétique d'enzymes produites à partir de souches de micro-organismes. Divers microorganismes, notamment différentes espèces d'actinomycètes présentent des capacités de biodégradation des molécules organiques aussi variées que récalcitrantes. Cette fonction de biodégradation est due à la variété d'enzymes qu'elles peuvent synthétisé telles que les cellulases, les xylanases, les amylases et les lipases (A.J.Mc Carthy et al.,1992). Ces dernières années, il a été rapporté que des enzymes thermoactives ont été extraites des souches bactériennes du type Actinomycètes thermophiles, parmi ces enzymes on cite les keratinases d'Actinomadura keratinilytica (A.Habbeche et al., 2014).

C'est dans ce contexte que nous nous sommes intéressés à la recherche d'enzymes lipasiques produites par des souches bactériennes d'Actinomycètes autochtones thermophiles issues du compost de poulet qui est connu pour abriter des microorganismes thermophiles. Dans le présent travail, une souche d'actinomycète isolée à partir d'échantillons de déchets de volailles riches en matières organiques, ont fait l'objet d'un criblage dans cette optique.

La première partie de ce manuscrit est consacrée à une présentation bibliographique sur les actinomycètes en général ainsi qu'un aperçu sur les enzymes lipasiques. La seconde partie du document développe les méthodes utilisées et les résultats obtenus relatifs aux différentes étapes de ce travail à savoir l'extraction et l'isolement de l'enzyme lipidique, l'optimisation de production de l'enzyme.

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