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Analyse physico-chimique et microbiologie de lait UHT demi-écrémé

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par Akli Bordjah
centre de formation professionnelle El Hidhab Sétif Algérie  - BTS en contrôle de qualité dans les industries agroalimentaires 2011
  

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I-3-2-Analyses microbiologiques de poudre du lait :

Le lait en poudre est un produit très riche en éléments nutritifs qui peuvent favoriser la croissance de divers micro-organismes surtout dans le cas oü l'hygiène et les conditions de fabrication, ainsi que celles du conditionnement ne sont pas respectées c'est pour cette raison qu'on réalise des analyses de contrôle de la qualité de la poudre du lait avant la reconstitution.

A- Dénombrement de la flore aérobie mésophile totale

· Préparation des dilutions

+La dilution mère:

Introduire aseptiquement dans un flacon stérile en verre 10 g de poudre du lait, ajuster avec le liquide Ringer jusqu'à 100 ml.

+ Les dilutions décimales :

Introduire aseptiquement à l'aide d'une pipette stérile 1ml de la dilution mère dans un tube stérile contenant au préalable 9ml du diluant (liquide Ringer), on obtient donc la dilution 10-2.

A l'aide d'une autre pipette stérile introduire 1 ml de la dilution (10-2) obtenue dans un tube stérile contenant au préalable 9 ml du diluant (LR), on obtient la dilution 103 ; de la même façon préparer les dilutions (10-4,10-5).

· La technique d'ensemencement

L'ensemencement par 1 ml de chaque dilution (10-1,10-2, 10-3, 10-4,10-5) S'effectue en masse sur milieu PCA.

Deux témoins sont toujours réalisés, l'un pour le milieu PCA, l'autre pour le diluant (LR), L'incubation des boites est réalises à 30 °C pendant 72h.

· Expression des résultats:

v' Les colonies sont comptées quelle que soit la taille, à l'oeil nu.

v' Ne compter que les boites contenant de 15 à 300 colonies.

v' Le nombre de microorganisme par millilitre est calculé à l'aide de la formule précédente.

N=ÓC/ (n1+0,1 n2+...) d

Solution mère

Incubation 72 h à 30°C

1 ml

10g de poudre 90ml de L.R

10-1 10-2 10-3

PCA

PCA

9 ml de liquide Ringer 1/4 dans chaque tube

1 ml 1 ml

temoin

Dénombrement des colonies

PCA

PCA

PCA

PCA

PCA

1 ml 1 ml

temoin

10-4 10-5

PCA

PCA

L.R

L.R

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Figure N°8 : Dénombrement des germes totaux de la poudre de lait

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B-dénombrement des coliformes totaux et coliforme fécaux :

· mode opératoire :

> Ensemencer 3 tubes de milieu liquide BLBVB (avec cloche de Durham) avec 1ml de la dilution mère.

> Incuber à 37°C pendant 48h

> Après incubation réaliser un repiquage sur 3 autres tubes contenant le milieu BLBVB (avec cloche de Durham) et incuber à44°C pendant 24h.

· Expression des résultats :

v' Un résultat positif s'exprime par le virage du milieu au jaune, avec production de gaz au moins à1/10 de la cloche.

v' Le nombre des coliformes est déterminé avec la table de NPP de la poudre. (Annexe N°6).

Milieu BLBVB
+cloche

Milieu BLBVB
+cloche

Milieu BLBVB
+ cloche

1ml

Solution mère

1ml

1ml

Incubation 48 h à 37°C
pour dénombrement de CT

Repiquage
(Avec quelques gouttes de chaque tube)

Incubation 24 h à 44°C
pour dénombrement de CF

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Lecture

Figure N°9: Recherche et dénombrement des coliformes fécaux et totaux
dans la poudre de lait

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