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Utilisation comparée de la gélose chocolat à base d'hémoglobine en granulées et de la gélose chocolat à base de sang de mouton défibriné pour la culture de trois espèces bactériennes méningées

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par Antoine A. & Fêmi Jacques H. DANSOU & SETONDJI
Université d'Abomey- Calavi au Bénin - Licence professionnelle en analyses biomédicales 2008
  

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II-3-2-Examen bactériologique

L'examen bactériologique comporte deux étapes :

-L'examen microscopique direct est un temps essentiel, toujours réalisable sur place. Associé à l'examen cytologique précédent il fournit un maximum de renseignements.

-La culture bactériologique est réalisable seulement dans un laboratoire
auquel on adressera le LCR. Les réponses toujours tardives et les
résultats aléatoires, dépendent en partie des conditions du transport et

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Présenté et soutenu par Antoine A. DANSOU et Jacques Fêmi SETONDJI

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surtout de sa rapidité. Le laboratoire confirme la nature du germe et détermine sa sensibilité aux antibiotiques.

L'examen bactériologique est orienté par l'aspect du LCR et par l'examen cytologique.


· Liquide trouble

L'examen cytologique montre le plus souvent un LCR riche en polynucléaires plus ou moins altérés. Cependant l'examen cytologique de certains LCR louches révèle parfois une lymphocytose. Il s'agit des méningites lymphocytaires à forte réaction cellulaire.

*Recherche directe des germes

Colorer par la coloration de Gram une des lames préparées par l'étalement du culot de centrifugation. Examiner à l'objectif à immersion. Les germes sont parfois très rares, L'observation doit être prolongée et minutieuse. Sa négativité n'élimine pas une étiologie bactérienne. [2]

Les germes les plus fréquemment rencontrés sont :

-Les pneumocoques (Streptococcus pneumoniae) ; cocci Gram positifs, lancéolés en flamme de bougie, groupés en diplocoques, en courtes chaînettes, un halo clair visible autour des corps bactériens traduit l'existence d'une capsule polysaccharidique définissant plus de 84 sérotypes. Les germes sont toujours abondants et accompagnés de polynucléaires. Les pneumocoques sont des hôtes habituels des voies aériennes supérieures ; Ils colonisent fréquemment le rhino-pharynx et déclenchent de fréquentes infections des voies aériennes (otites, sinusites). Les bactéries peuvent parfois être disséminées par voie sanguine et donner des méningites, des péritonites, des arthrites, des endocardites. Sa croissance nécessite des milieux enrichis [4].

-Les méningocoques (Neisseria meningitidis) : cocci Gram négatifs, groupés en diplocoques « grain de café » intra ou extra-cellulaires, peu

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nombreux, souvent rares sur un fond de polynucléaires intacts ou altérés. C'est un germe fragile (froid, dessiccation) qui croît sur milieux enrichis en présence de CO2. C'est une bactérie capsulée, possédant une capsule polysaccharidique permettant de distinguer 12 sérogroupes (A, B, C, H, I, K, L, X, Y, Z, 29E et W135). Neisseria meningitidis est une

bactérie strictement humaine, retrouvée dans le rhino-pharynx transmise par voie aérienne. A partir d'un portage dans le rhino-pharynx très fréquent durant l'hiver, la bactérie peut passer dans le sang dans un faible pourcentage de cas (septicémie) et gagner les méninges, produisant une méningite [4].

Une méningite purulente dans laquelle on ne trouve pas de germe, doit faire suspecter une étiologie méningococcique [2].

- Bacilles de Pfeiffer (Haemophilus influenzae), petits bacilles Gram négatifs, coccobacillaires intra ou extra-cellulaires. Haemophilus influenzae est un bacille fragile, croissant sur milieux enrichis. Il possède une capsule polysaccharidique avec 6 sérotypes (a, b, c, d, e et f). Le sérotype b est celui qui pose de loin le plus de problèmes de Santé Publique car il est le principal responsable d'infections invasives (méningites, pneumonie, septicémie, arthrites....). Les autres sont responsables surtout d'otites. Haemophilus influenzae est une bactérie strictement humaine, transmise par voie aérienne. Les bactéries colonisant le rhino-pharynx peuvent induire des infections ORL (otorhino-laryngologie) très fréquentes et parfois pulmonaires (otites, sinusites, épiglottites, pneumonies). Les bactéries peuvent disséminer par voie sanguine chez quelques enfants donnant une septicémie isolée (rare) souvent infectant les méninges (méningites) ou éventuellement les

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articulations (arthrites). L'association de forme coccobacillaires, de bâtonnets et de formes longues est relativement fréquente. [4]

Rappelons que cette méningite à Haemophilus influenzae est l'apanage des enfants de 3 mois à 3 ans [2].

D'autres germes peuvent être observés :

- Les staphylocoques, cocci Gram positifs, réguliers de forme et de taille groupés en amas caractéristique (grappe de raisin).

- Les streptocoques, cocci Gram positifs plus ou moins réguliers, disposés en chaînettes.

- Les entérobactéries : bacilles Gram négatifs.

- Les listeria : bacilles Gram positifs de petites tailles non sporulés, non capsulés, isolés, groupés par pair ou en petits « amas palissadiques », intra ou extra-cellulaires. [2]

Tableau II : Germes pouvant être isolés dans le LCR [8]

Groupe

Gram

Aspect

Germe

 
 

Souvent abondants lancéolés,

 

Cocci

 
 
 
 

+

par deux ou en courtes
chaînettes capsulés

Pneumocoque

Cocci

 

Souvent rares, en grains de

 
 

-

café, intra ou extra cellulaires

Méningocoque

Bacille

 
 

Haemophilus

 

-

Intra ou extra cellulaires

influenzae

Cocci

 
 
 
 

+

Régulier en amas

Staphylocoque

Cocci

+

En chaînette

Streptocoque

 

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Bacille + Isolé ou en palissade, intra ou Listeria

extracellulaire


· Liquide clair [2]

L'examen cytologique montre le plus souvent des lymphocytes, parfois quelques polynucléaires.

- LCR clair à lymphocytes prédominants :

Deux étiologies dominent :

" Les méningites virales, de loin les plus fréquentes.

" Les méningites tuberculeuses, relativement rares.

Il ne faut pas omettre la possibilité d'une méningite bactérienne au début. Le

diagnostic est orienté par le contexte clinique et relativement par les examens biochimiques.

Si on soupçonne une tuberculose méningée : effectuer une coloration de Ziehl-Neelsen sur une des lames d'étalement du culot de centrifugation à la recherche des bacilles tuberculeux acido-alcoolorésistants. Ce sont des bacilles fins, grêles gardant la coloration de la fuchsine, le plus souvent isolés ou en petits amas. En raison de leur rareté, cette recherche doit être minutieuse et prolongée.

- LCR avec polynucléaires prédominants : Il s'agit d'une méningite à réaction cellulaire faible :

" Soit parce qu'on se trouve à un stade très précoce de la méningite purulente. L'examen minutieux du culot de centrifugation après coloration de Gram, doit s'efforcer de découvrir le germe en cause.

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v' Soit il s'agit d'une méningite purulente décapitée par une antibiothérapie.

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