Contribution à l'étude de l'activité antimicrobienne du genévrier(Juniperus phoenicea ): essai des huiles essentielles et composés phénoliques

République Algérienne Démocratique et Populaire
Ministère de l'enseignement et de la recherche scientifique
Université A.Mira- Bejaia
Faculté des sciences de la nature et de la Vie
Département de Biologie physico-chimie

Mémoire

En vu de l^~obtention du diplôme de Master en Biologie
Option Biochimie Appliquée

1'hème

Contribution à l^~étude de l^~activité

antimicrobienne du Genévrier (Juniperus

phoenicea) : Essai des huiles essentielles et

composés phénoliques

Présenté par:

· DJENADI Fouzia

· FARHI Nouara

Promoteur : %jr 2AWI 1'.

Présidente dujury : %jme 0E010'0 F. Examinatrice : %jerle 1'0'0A1'1 N.

Année Universitaire

2010/ 2011

Remerciements

Nous remercions Dieu le tout puissant de nous avoir donné le courage et la patience pour réaliser ce modeste travail.

La première personne que nous tenons à remercier est Mr HARFI T. d'avoir accepté de nous encadrer et qui a su nous laisser la liberté nécessaire à l'accomplissement de notre recherche, tout en y gardant un Sil critique et avisé. Merci pour votre rigueur scientifique et vos conseils toujours judicieux et aussi d'avoir eu la patience

de corriger notre mémoire et de nous avoir responsabilisées du début jusqu'à la fin de notre travail.

Nous aimerons remercier tout particulièrement Dr TOUATI A. pour nous avoir accueillies au sein du laboratoire de Microbiologie et permis ainsi d'effectuer ce travail dans la liberté totale, Merci pour votre générosité et votre bonne humeur.

Nous remercions MmeBEDJOU F. la présidente du jury c'est un honneur pour nous, et Melle TOUATIN. d'avoir accepté d'examiner notre travail.

Nous témoignons toute notre gratitude pour : Mr ADJAOUD A, Melle BOUGOFFA K., Mme BENACHOUR, Mr AMROCHE F.et Mr ZAIDIpour l'aide qu'ils nous ont apporté durant notre travail.

Nous exprimons aussi notre reconnaissance à : Mr MONKO D., Mr BOUADHAM S., MrBOUCHENOUA F., Mr BELMAHDI M., Mr BAKOUR S., Mr BETTACHE A., Melle TIGHIDET S. et Mme RAHMANI D. pour leur gentillesse, leur aide et précieux conseils durant notre travail au laboratoire.

Un grand merci Pour Mr GHERBI R., de la Polyclinique d'El-Kseur pour sa générosité et sa gentillesse.

Un merci spécial pour nos camarades et amis (es) qui ont participé de prés ou de loin pour accomplir notre recherche.

Védicaces

A mes très chers parents

Vous m'avez donné le jour et vous m'avez accompagné dans mes premiers pas.

Aujourd'hui, je suis le fruit de vos efforts et de toute votre attention. Soyez
infiniment remerciés. Sachez que je vous aime profondément et que je vous suis
reconnaissante. Que Dieu vous donne une longue vie.

A mes très chères sSurs :

Farida, Dihia, Hafsa ( ma jumelle) ; Nawel et Hanane, Je vous remercie
chalheureusement pour votre soutien et encouragements, vous êtes ma raison de
vivre.

A mon frère et sa femme.

A mes neveux adorés , une fois grands , ils comprendront ce travail: Tafath,

Maria, Massil, Asma et Yasmine.

A mes très chers amis de toujours Kahina et Mehdi qui m'ont beaucoup souenue.

Ainsi qu'à tous mes amis et camarades.

FOUZIA.

iv&Iicaces

Je dedie ce modeste travail à mes precieux parents qui m'ont tous donné, qui ont
toujours été la pour moi et toute mafamille surtout mes sSurs Aziza ,Karima et
son mari Hocine et leurs enfants Katia et Walid

A mon cher frére Kamel, sa femme Hassina et leur enfant Ilias.
A mon cher mari Fouad qui a été toujours à mes cotés et à toute sa famille
A mes meilleures amies : Lili, Amel, fayza.
A mes copines de chambre : Lahna, Myada, mirouche, souad, Lydia.

Et à ceux qui me sont très chers et qui m'ont aidé de prés ou de loins à réaliser ce

travail

.

Nouara

Liste des abréviations

Liste des figures

Liste des tableaux

Introduction 01
Partie bibliographiques

Chapitre I ; Généralités sur les plantes médicinales et leurs substances
antimicrobiennes

I.Les plantes médicinales 03

I.1.Etudes des plantes médicinales 03

I.2. Intérêt de l'étude des plantes médicinales 03

II. Substances antimicrobiennes d'origine végétale 04

II.1. Les composés phénoliques (polyphénols) 05

II.1. 1. Classification des composés phénoliques 05

II.1.2. Principaux composés phénoliques à pouvoir antimicrobien 05

II.1.3. Mode d'action de quelques composés phénoliques 07

II.2. Les huiles essentielles : 07

II.2.1. Définition 07

II.2.2. Composition chimique : 07

II.2.2.1. Composés terpéniques 08

II.2.2.2. Composés aromatiques dérivés de phényl propane 08

II.2.3. Propriétés physiques 09

II.2.4. Activités biologiques des huiles essentielles 09

II.2.4.1. Industrie alimentaires 09

II.2.4.2. Désinfection des locaux 09

II.2.4.1.3. Activité pharmaco-thérapeutique 09

II.2.4.1.3.1.Activité antimicrobienne des huiles essentielles 10

II.2.5. Techniques d'étude de l'activité antimicrobienne des huiles essentielle 12

II.2.5.1. Définition de l'aromatogramme 13

II.2.5.2. Méthode du puits ou cylindre 13

II.2.5.3.Méthode de dilution 13

Chapitre II : Notions sur la plante investiguée

I. Biologie de Juniperusphoenicea (Genévrier) 14

I-1- Description du Genévrier 14

I.2. Taxonomie 15

I.3. Caractères botaniques deJuniperusphoenicea 15

I.4. Variation géographique est systématique de Juniperusphoenicea 16

II. Etude phytochimique de Juniperusphoenicea 17

II.1. Composition chimique 17

II.1.1. Composition en huiles essentielles 18

II.3. .2. Composition en polyphenols 20

II.3.1.1. Caractérisation des flavonoïdes 20

III. Les différentes activités de Juniperusphoenicea 21

III.1. Activité antimicrobienne 21

III.1.1 Activité antibactérienne 21

III.1.2. Activité antifongique 22

III.2. Activité antioxydantes 22

III.3. Activité insecticide 22

III.4. Effet anti-fécondité (effet stérilisant) 23

III.5. Rôle protecteurcontre l'hépatotoxicité du CCl4 23

III.6. Activité cytotoxique de Juniperusphoenicea 24

Partie Expérimentale
Chapitre III : Matériel et Méthodes

I. Matériel 25

I.1. Matériel végétal 25

I .2.Matériel biologique 25

I.2.1. les souches microbiennes utilisées 25

I.2.2. les caractères biologiques de différentes souches utilisées 26

I.3. Solvants, réactifs et milieux utilisés 27

II. Méthodes 28

II.1. Méthodes d'extraction 28

II.1.1. Extraction de l'huile essentielle de Juniperusphoenicea 28

II.1.2. Extraction des composés phénoliques 28

II.2. Isolements et Tests de confirmation 30

II.2.1. Isolement des souches 30

II.2.2. Tests de confirmation 30

II.3. Activité antimicrobienne 30

II.3.1. Activité antibactérienne de l'huile essentielle 30

II.3.1. 1. Aromatogramme sur milieu solide 31

II.3.1. 2. Aromatogramme sur milieu liquide 32

II.3.1. 3. Activité de l'HE en phase gazeuse (Microatmosphére) 33

II.3.1. 4. Activité en fonction de dilution 34

II.3.2. L'activité antibactérienne des composés phénoliques 35

II.3.3. L'activité antifongique de l'huile essentielle et composés phénoliques 35

II.3.3.1. La méthode des puits 35

II.3.3.2. La méthode des disques 35

II.3.3.3. Microatmosphére 37

Chapitre IV : Résultats et Discussion

I. Résultats 38

I.1. Extraction de l'huile essentielle 38

I.2. Tests de confirmation 39

I.3. Activité antimicrobienne 39

I.3.1. Activité antibactérienne de l'huile essentielle 40

I.3.1.1. Aromatogramme Sur Milieu solide 41

I.3.1.2.Microatmosphére (état gazeux) 43

I.3.1.3. Aromatogramme sur milieu liquide 44

I.3.2.. Activité antibactérienne des composés phénoliques 45

I-3.3..Activité antifongique de l'huile essentielle et composés phénoliques de J.phoenicea. 48

II. Discussion 51

Conclusion 54

Références Bibliographiques

Glossaire

Annexes

Liste des abréviations