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Contribution à  l'étude de l'activité antimicrobienne du genévrier(Juniperus phoenicea ): essai des huiles essentielles et composés phénoliques

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par Fouzia Djenadi
Université A Mira de Béjaia Algérie - Master en biologie option biochimie appliquée 2011
  

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Chapitre Iv ;

Resultats et Discussion

Résultats et Discussion

I. Résultats

I.1. Extraction de l'huile essentielle

Ø Résultat de l'extraction :

L'huile essentielle de Juniperus phoenicea obtenue par hydrodistillation est un liquide visqueux, limpide d'une coloration jaunâtre et à odeur forte caractéristique du genévrier.

Ø Le rendement

Le rendement en huile essentielle de J. phoenicea local est de 0,42. Il diffère d'un pays à un autre (Derwich et al, 2010b). (Tableau N° XI).

Tableau N° XI : Comparaison des rendements en huile essentielle de J.phoenicea de différents pays.

Extrait

Tunisie

(Bouzouita
et al, 2008
)

Maroc

(Derwich et al, 2011)

Egypte (El-Sawi et al, 2007)

Portugal

(Adams et al, 1996)

Espagne

(Adams et al, 1996)

Grèce

(Adams et al, 1996)

J .phoenicea

0,5 %

1,62 %

1,96 %

0,41

0,66 %

0,58%

I.2. Tests de confirmation

Les résultats des colorations de Gram et du test de catalase effectués sur les différentes souches bactériennes utilisées sont indiqués dans le tableau N° XII:

Tableau N° XII : Résultats des colorations de Gram et test de catalase réalisés sur les différentes souches bactériennes utilisées :

Souches bactériennes

Gram

Catalase

Escherichia coli ATCC 25 928

· Bacilles

· Gram négatif

+

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

· Bacilles

· Gram négatif

+

Staphylococcus aureus ATCC 4330D

· Cocci

· Gram positif

+

Bacillus sp

· Bacilles

· Gram positif

+

 

Ces résultats confirment les caractéristiques des souches testées.

I.3. Activité antimicrobienne

L'activité antimicrobienne des huiles essentielles et composés phénoliques de J.phoenicea est évaluée sur cinq souches microbiennes de référence (quatre souches bactériennes et une souche fongique). Cette activité est évaluée par la méthode d'aromatogramme, le pouvoir antimicrobien de cette huile volatile et composés phénoliques est obtenu par la mesure du diamètre de zone d'inhibition en mm.

L'échelle de l'estimation de l'activité antimicrobienne est donné par Mutai et al (2009) ; ils ont classé les diamètres de zones d'inhibition (D) de la croissance bactérienne en 5 classes ;

· Très fortement inhibitrice : D e30mm

· Fortement inhibitrice : 21mmd Dd 29mm

· Modérément inhibitrice ; 16mmdDd20mm

· Légèrement inhibitrice : 11mmdDd 16 mm

· Non inhibitrice : D< 10

I.3.1. Activité antibactérienne de l'huile essentielle

Résultats du pré-test

Les résultats des pré- tests sont représentés dans le Tableau N° XIII

Tableau N° XIII: Résultats obtenus des pré-tests

Souches bactériennes

Résultats
(Activité)

D (mm)

E1 (mm)

E2 (mm)

E3 (mm)

Escherichia coli 25 928

+

14.0 mm

9mm

9mm

11mm

Pseudomonas aeruginosa 27853

-

/

/

/

/

Staphylococcus aureus 4330D

++

31.78 mm

15mm

10mm

10mm

Bacillus

+

9.0 mm

NT

NT

NT

+: HE active. ++ HE très active. - HE n'est pas active. /: Pas de zone. NT : Non testée.

E 1 : Diamètre de zone d'inhibition de test 1

E 2 : Diamètre de zone d'inhibition de test 2

E 3 : Diamètre de zone d'inhibition de test 3

E 1, E 2, E 3 : l'HE diluée en 1/10 dans le DMSO

Résultats des tests

I.3.1.1. Aromatogramme sur milieu solide

Tableau N° XIV: Résultat de l'activité antibactérienne de l'HE de J.phoenicea sur milieu solide

Souches

Zones
d'inhibition
(D1) en mm

Contrôle positif

Zones
d'inhibition
fonction du taux
de dilution
(D2) en mm

TE

CN

SXT

Escherichia coli ATCC 25 928

11 mm

25mm

R

28mm

00

Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

-

NT

NT

NT

NT

Staphylococcus aureus ATCC 4330D

19,5 mm

25mm

26mm

30mm

19 mm

Bacillus sp

16 mm

28mm

25mm

15mm

11 mm

- Pas d'activité. NT : Non Testé. R : Résistance.

Les résultats de l'activité antibactérienne de l'HE de J.phoenicea utilisant la méthode des disques sur milieu gélosé ont montré que l'HE exhibe une activité contre trois souches bactriennes sur quatre germes testés en dépit de leur morphologie et de leur Gram. En effet l'HE de J.phoenicea exerce une forte activité sur les bactéries à Gram positif, comme on peut le voir dans le Tableau N° XIV, S.aureus 4330D est la souche la plus sensible avec une zone d'inhibition maximale de 19,5 mm, suivie de Bacillus sp avec 16 mm et une zone minimale de 11 mm pour E .coli 25 928 . Nous avons enregistré une absence d'activité sur Pseudomonas aeruginosa 27853 (Fig. 11). Toutefois, des zones d'inhibition ont été plus faibles que celles des antibiotiques, qui ont montré une inhibition très forte de la croissance bactérienne. (Fig. 12).

Pour les zones d'inhibition obtenues à partir de l'huile diluée en (1 :2, 1 :4, 1 :8 et 1 :16),
nous avons remarqué une inhibition de croissance maximale pour l'huile diluée en 1 :2 , pour
S.aureus 4330D une zone d'inhibition de 19 mm de diamètre , Bacillus sp 11 mm de

diamètre , et sur E. coli 25 928, l'huile diluée n'est pas active avec 0, 00 mm de diamètre. Les résultats ont montré que l'activité diminue avec les dilutions. (Fig. 13).

Figure N° 11 : Activité antibactérienne de l'HE (1 ,2 ,3 tests en triple. 4 : l'HE diluée dans le DMSO à 1/10) .A : E. coli 25 928 .B : Ps.aeruginosa 27853 .C : S.aureus. 4330D. D : Bacillus sp.

Figure N° 12 : Comparaison entre les antibiotiques et l'HE de J.phoenicea. A : E. coli 25 928 .B : S.aureus. 4330D. C : Bacillus sp. HE : Huile Essentielle. CN : Cefaléxine, TE : Tétracycline. SXT : Trimethoprimsulphamethoxazol.

Figure N° 13 : Activité antimicrobienne en fonction du taux de dilution de l'HE. A : E. coli 25 928 .B : Ps.aeruginosa 27853 .C : S.aureus. 4330D D : Bacillus sp.

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