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Bioconversion enzymatique des composés phénoliques des effluents issus de l'extraction d'huile d'olive: une voie prometteuse de valorisation par la production de l'hydroxytyrosol naturel

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par Manel HAMZA KARRAY
Université de Sfax école nationale d'ingénieurs de Sfax - Doctorat en biologie 2013
  

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VI- Technologies de séparation de l'hydroxytyrosol par membrane

Dans les applications récentes, la filtration sur membrane est plus préférable être appliquée en mode transversal. Dans la filtration à écoulement tangential, l'alimentation est pompée dans le module à membrane, où il est séparé en deux courants à savoir le filtrat (ou perméat) et le rétentat, dans lequel l'espèce retenu a été concentrée. L'ultrafiltration à courants croisés diffère de la filtration frontale conventionnelle en ce que le rétentat s'écoule parallèlement à travers la surface de la membrane et non perpendiculaire vers celle-ci (Lojkine et al., 1992). Ce mouvement tangentiel des fluides supprime la majeure partie du matériau rejeté à partir la surface de la membrane, et minimise par conséquent, l'accumulation sur la surface de la membrane. On sait que les technologies membranaires emploient des filtres spéciaux (membrane) qui sont exploités dans un état fluido-dynamique particulièr (tangentiel) qui permettent de réduire l'encrassement du filtre et assure par conséquent un grand flux de perméat en fonction du temps (Cheryan, 1986). Ces technologies sont définies comme BAT (Best Available Technology) de l'EPA (Environmental Protection Agency) et sont également reconnus par l'Union européenne (UE). Les technologies membranaires sont largement appliquées dans le monde entier non seulement pour le traitement des eaux usées, mais surtout pour la récupération de solutés dispersées, souvent polluant, et pour produire de l'eau purifiée.En outre, le traitement des margines est basé sur l'application de la technologie

Résultats et Discussion

membranaire dans le but d'extraire et récupérer le maximum de polyphénols afin de faciliter l'évacuation de ces déchets (Pizzichini & Russo, 2005; Russo, 2007).

Dans cette étude, le traitement des margines par l'application de la technologie de membrane a été proposé dans le but d'extraire et récupérer le maximum de polyphénols afin de faciliter l'élimination de ces déchets. Le système hydraulique de traitement de margines avec les membranes est rapporté dans la figure 47.

MF

UF

Concentration (CC)

70 L 37.5 L

VCR

2.15

VCR

3.95

28 L

VCR

12.72

â-glucosidase
500 IU/ml

143

32.5 L 9.5 L 2.2 L

Rétentat MF Rétentat UF Concentrat CC

Figure 47 : Processus de la mise en place de la section membranaire.

La figure 47 montre la voie de traitement par fractionnement de margine brut. Ce processus de traitement permet la séparation des margines brutes en quatre fractions liquides dans différents pourcentages volumétriques. Compte tenu de 70 L de margines, comme charge de MF, les volumes respectifs de perméat et le concentré de chaque section de la membrane et le rapport de concentration en volume (VCR) entre le volume d'alimentation initial/volume de rétentat final de chaque section de membrane sont rapportés sur la figure 47. Selon le procédé proposé, le margine est soumis à une hydrolyse enzymatique par la â-glucosidase pour hydrolyser l'oléuropéine et des composants verbascosides de margines afin d'être amélioré en hydroxytyrosol libre dans les margines (Fig. 42, 43,44, 45). La fraction liquide séparée à partir des produits de dégradation est ensuite utilisée dans un système de membrane comprenant la microfiltration tangentielle, l'ultrafiltration tangentielle et une unité d'évaporation, dans l'ordre. Tous les deux fractions de rétentat de la membrane, respectivement 32,5 L de MF et de 9,5 L d'UF constituent les nouveaux produits raffinés avec l'ajout de l'25,8 litres d'eau purifiée, après les étapes de concentration et de 2,2 L de volume de concentré enrichi en polyphénols. Le concentré ultime du système après évaporation est riche en hydroxytyrosol (7,2 g / L de HT) (Fig. 48, Tableau 16).

144

Résultats et Discussion

Figure 48 : Les chromatogrammes de CLHP de composés phénoliques (détection à ë = 280 nm) des extraits de perméat de MF (a), de rétentat MF (b), perméat de l'UF (c), le rétentat UF (d), avant de concentration (e) et après concentration (échantillon était dilué 10 fois) (f). 1, hydroxytyrosol, 2, tyrosol, 3, composé non identifié, 4, oléuropéine.

145

Résultats et Discussion

Le flux de perméat en fonction du temps, pour les sections de MF et d'UF sont présentés sur la figure 49.

Figure 49 : Flux de perméat en fonction du temps des sections membranaires de microfiltration (MF) et ultrafiltration (UF).

Comme c'est indiqué dans la figure 49, la réduction de flux de perméat, représente une tendance classique pour les technologies membranaires, mais les profils de la productivité des deux sections de filtration baissent lentement, ceci est une démonstration d'un règlement de paramètre d'un procédé satisfaisant. Quand un processus de filtration sur membrane telles que l'ultrafiltration est utilisée, le flux et le rendement en baisse peut être observé. Les causes sont: i) la polarisation de concentration (à savoir l'accumulation des solutés de façon réversible est survenu immédiatement) et ii) des phénomènes d'encrassement comme l'adsorption, bouche-pores et le dépôt de solutés solidifiés, un processus à long terme, et plus ou moins irréversible. Le résultat de ces deux phénomènes est une force d'entraînement pour la diminution de la filtration ou d'une augmentation de la résistance contre le transport du solvant pénétrant lors de la filtration. Le degré de diminution du flux dépend de nombreuses variables qui sont les solutions et les équipements (Van den Berg & Smolders, 1990).

Le tableau 15 résume les conditions opératoires de chaque section de la membrane. Les flux initiaux de traitement de margine par MF et UF étaient de 42,85 et 103,89 L/m2h sous des pressions transmembranaires de 1,8 et 2,2 bar, respectivement.

Tableau 15 : Caractéristiques techniques des membranes

Membrane

Process

Conformation

Cut-off/area

DP(bar)

T (°C)

Hexagonal Ceramic, Tami

MF

MICROLAB 130 S Tubular 19 canals 850 mm length 7 mm in diameter

0.2 um/0,2 m2

1-2

25-30

Organic

UF

18 PCI Ultrafiltration membranes 135 mm diameter 1220 mm length

8KD/0,0825 m2

2-3

18-20

146

Résultats et Discussion

L'efficacité des différentes conditions de fonctionnement a été évaluée par la détermination de la demande chimique en oxygène (DCO), le pH, la conductivité, la concentration de l'hydroxytyrosol, la teneur en composés phénoliques totaux et la matière séche. La charge en DCO est due à la teneur en matières organiques, notamment des composés azotés, des sucres, des acides organiques, des huiles, de cellulose et des composés polyphénoliques. Elle est de concentration égale à 165 g/L dans la margines brute. Une réduction substantielle de la DCO et de matière séche a été obtenue. La technologie de membrane fournit un perméat légèrement coloré (données non présentées), ce qui nécessite nettement moins de DCO pour son oxydation (3,42% de la DCO initiale) (Tableau 16). La microfiltration élimine 72,12% des DCO initiale. En effet, le rétentat de microfiltration contient toute la matière organique dans les margines se présentant sous la forme d'une suspension de matière insoluble. Alors que, les composés hydrophiles tels que les sucres réduits, l'hydroxytyrsosol et les minéraux se trouvent dans le perméat de MF. Le taux de rejet de l'hydroxytyrosol variait de 8 à 9%. Ce processus permet de récupérer seulement 24% des hydroxytyrosol dans le concentré final. Ce pourcentage peut être considérablement améliorée en prévoyant une dilution de rétentat de MF et d'UF par de d'eau pure, tout en répétant le processus (données non montrées).

Tableau 16: Le pH, la teneur en matière séche, la conductivité, la demande chimique en
oxygène, le contenu en phénols simples et la concentration d'hydroxytyrosol avant et après
l'hydrolyse enzymatique des margines et après la microfiltration, l'ultrafiltration et la
concentration.

Margine Brute Hydrolysed OMW Microfiltration

Ultrafiltration

Concentration

P R

P

R

 

pH

 
 
 
 
 

5.03#177;0.2 4.93#177;0.2

4.78#177;0.2

4.73#177;0.2

4.81#177;0.2

4.79#177;0.2

4.84#177;0.2

Matière séche (g/100g)

 
 
 
 
 

9.33#177;0.5 9.23#177;0.5

6.28#177;0.5

11.12#177;0.5

4.71#177;0.5

5.72#177;0.5

41.95#177;0.5

Conductivité (ms)

 
 
 
 
 

11.26#177;0.5 11.25#177;0.5

11.17#177;0.5

10.62#177;0.5

10.29#177;0.5

10.7#177;0.5

15.11#177;0.5

DCO (g/l)

 
 
 
 
 

165.76#177;1.5 165.83#177;1.5

57.76#177;1.5

119.25#177;1.5

48.44#177;1.5

59.62#177;1.5

nd

Ortho phénols totaux (g/L)

 
 
 
 
 

4.5#177;1.2 5.5#177;1.2

3.31#177;0.5

7.27#177;1.2

1.96#177;0.2

2.7#177;0.5

17.6#177;2.5

Sucre Reducteur (g/L)

 
 
 
 
 

26#177;3.2 60#177;4.2

nd

nd

nd

nd

158.21#177;8.5

Hydroxytyrosol (g/L)

 
 
 
 
 

0.23#177;0.2 0.93#177;0.2

0.85#177;0.1

0.72#177;0.1

0.79#177;0.1

0.807#177;0.1

7.2#177;1

P: Perméat ; nd: non determiné ; R:Rétentat ; DCO : Demande Chimique en Oxygène (g/L)

147

Résultats et Discussion

Les résultats de caractérisation de margine après séparation membranaire par CLHP sont illustrés sur la Fig. 48. Ces chromatogrammes identifient un total de 3 composés, le composé majeur était l'hydroxytyrosol (Fig.48). L'extrait à l'acétate d'éthyle obtenue après hydrolyse enzymatique est riche en hydroxytyrosol plus de 1 g/L, mais pauvres en macromolécules comme l'oleuropéine, le verbascoside et la ligstroside. En utilisant la technologie des membranes de MF, ainsi que l'UF, l'hydroxytyrosol et le tyrosol, ayant des poids moléculaires faibles de 154 et 138 g/mol, respectivement, se trouvent concentré dans le rétentat (Fig.48). Ainsi, la diafiltration est nécessaire pour récupérer au maximum ce composé. L'élimination de l'eau par l'évaporation à des températures modérées a permis l'obtention d'un concentré riche en hydroxytyrosol. Les résultats obtenus montrent que le prétraitement enzymatique, MF, UF et la concentration avec l'évaporation peuvent être utilisés comme un traitement efficace des margines au processus doux. Un tel prétraitement peut améliorer efficacement un processus d'extraction ultérieure des composés phénoliques du perméat et améliore l'efficacité de tout traitement secondaire. En outre, 41% de l'enrichissement de phénols totaux est due à la libération de l'hydroxytyrosol (Tableau 16). Par conséquent, une production durable et plus propre d'une grande quantité d'hydroxytyrosol peut être atteint. L'utilisation du procédé à l'échelle pilote pour la récupération d'hydroxytyrosol naturel est une méthode alternative prometteuse. Le rétentat de l'unité de MF et d'UF peut également être utilisé pour y extraire des composés polyphénoliques ou peut être utilisé dans l'industrie alimentaire comme additif pour le pain, pizza, etc, mais il est aussi plus intéressant comme substrat pour la production de méthane en anaérobiose. Pizzichini & Russo (2005) ont révélé un processus proche pour récupérer totalement les composants chimiques des margines en utilisant des technologies membranaires.

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"Il existe une chose plus puissante que toutes les armées du monde, c'est une idée dont l'heure est venue"   Victor Hugo