III.2. Méthode
Pour déterminer quantitativement le taux de cyanure
dans les tubercules de manioc, nous avons utilisé la méthode
argentimétrique (méthode de titrage au nitrate d'Argent) et cela
en nous inspirant de la méthode décrite par BRUDZYNSKI (1982)
(6).
a. Principe
L'acide cyanhydrique libéré par hydrolyse
enzymatique est entraîné par la vapeur d'eau;
récupéré dans une solution alcaline et titré par
argentimétrie.
La réaction principale pendant la titration est la
suivante:
2 CN- + Ag+
[Ag(CN)2]-
L'on observe par contre que l'ion
[Ag(CN)2]- formé a tendance à se combiner
avec l'ion Ag+ à chaque addition de AgNO3; pour
former un précipité.
[Ag(CN)2]- + Ag+
Ag[Ag(CN)2]
Cette combinaison est rendue impossible étant
donné la présence d'un excès de NH4OH, qui
solubilise l'argento-cyanure d'argent.
L'on atteint la fin de la réaction lorsque tous les
ions CN- ont été liés. A cet instant, le
surplus d'Ag+ se combine aux ions I- contenus dans le
milieu réactionnel; suite à son insolubilité dans le
NH4OH, l'AgI précipite préférentiellement en
laissant un trouble (blanchâtre au jaunâtre) dans le
milieu.
b. Réactifs
Les différents réactifs utilisés ont
été préparés au laboratoire, soit par la
méthode de dilution, soit par la méthode de pesée. Ainsi
les différents réactifs sont :
- AgNO3 0, 1 M ;
- NaOH 0,75 M ;
- NH4OH 13 M ;
- KI 0,3 M.
C. Mode opératoire
- Dans dix ballons de 250 ml, râper 50 g de
matière fraîche ou sèche (manioc) et remplir d'eau jusqu'au
trait de jauge ;
- Après chaque intervalle de temps de 7 heures,
prendre un échantillon dans lequel l'on prélève 100 ml de
solution que l'on distille par entraînement à la vapeur pour
récupérer l'acide cyanhydrique libéré par
hydrolyse. Le deuxième échantillon est traité après
14 heures et ainsi de suite ;
- Le distillat est recueilli dans un erlenmeyer de 100 ml
contenant 5 ml de NaOH 0,75 M ;
- On arrête la distillation lorsqu'on atteint environ
10 ml de distillat ;
- Ensuite, on ajoute 5 gouttes de NH4OH et 2
gouttes de KI avant le titrage au AgNO3 0,1 M.
Ce titrage se fait sur fond noir afin de bien observer
l'opalescence due à la formation de AgI.
Dans l'essai à blanc, le distillat est remplacé
par l'eau distillée.
La différence des quantités: (ml) de
AgNO3 utilisé pour le titrage de l'échantillon, et
(ml) utilisé pour le blanc (eau distillée) indique la
quantité de cyanure dans l'échantillon.
Pour chaque échantillon, trois titrages sont
réalisés.
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