Sommaire
A- Introduction
....................................................................................................
7
I)-L'uridine monophosphate kinase d'Escherichia coli
(UMPKeco).................................................
12
A- Les
NMPK...........................................................................................................
12
1- Définition et Rôles
biologiques..............................................................................
12
2-Structures
3D.....................................................................................................
14
B-L'UMPKeco
..........................................................................................................
14
1-Une NMPK atypique
...........................................................................................
13
2-Structures 3D et propriétés
catalytiques.....................................................................
13
3-Rôles
............................................................................................................
17
4- Contexte et objectifs du
stage.................................................................................
17
II)-La Cytokinine oxydase de
maïs........................................................................................
19
A-Les
cytokinines.........................................................................................................
19
1. Nature chimique
..............................................................................................
19
2. Lieu de
synthèse................................................................................................
19
3.
Rôles............................................................................................................
19
B-La
CKOm...............................................................................................................
21
1. Propriétés et Structure
3D...................................................................................
21
2. Objectifs du stage
.............................................................................................
21
III)-La cristallogénèse des
protéines
.........................................................................................23
A-Aspects
généraux......................................................................................................
23
1. Le
cristal............................................................................................................
23
2. Principes de la
cristallogenèse.................................................................................
23
3. Etapes de la
cristallisation.......................................................................................
25
B-Méthodes de
cristallisation..........................................................................................
27
B-Matériel et méthodes
..........................................................................................
28
1. Clonage, surexpression et
purification..........................................................................
28
2.
Cristallisation......................................................................................................
28
..
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...
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......
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...
....
3. Etapes
ultérieures................................................................................................
31
C-Résultats et
discussion.......................................................................................
34
A)-Mutant D93A non régulé par le GTP de
l'UMPKeco ..............................................................
34
B)-CKOm native et mutant
D169E.......................................................................................
37
D-
Projets.........................................................................................................
41
Références
bibliographiques................................................................................................
42
Annexes........................................................................................................................
44
Résumé........................................................................................................................
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