Recherche et validation de résistance génétique au dépérissement bactérien causé par pseudomonas syringae chez l'abricotier.

2. Méthodes

a. Dispositif expérimental

Les individus sont répartis sur plusieurs rangs à raison d'un arbre par génotype disposés aléatoirement. Les observations ont été effectuées au mois de mai et juin 2014. Les variables mesurées sont:

Tableau 5: Dispositif expérimental mobilisé pour les études de sensibilité à Ps syringae

Inoculations	Populations	Années	Sites	Nbre d'individus	Variables mesurées	répétitions
Test rameaux	BerBa	2013	Gotheron (26)	224	Lgc, lge, bs, bi, diamètre, hauteur	5
		2014
	Collection	2013	Amarine (30)	587	Lgc, lge, bs, bi, diamètre, hauteur	3
		2014
Test feuilles	GoMo	2013	Amarine (30)	196	sévérité	4 x 4 feuilles
		2014
	Collection	2013	Amarine (30)	160	Sévérité	4 x 4 feuilles
		2014

b. Inoculations

Les inoculations ont été réalisées en période hivernale pour les inoculations sur rameaux conformément aux préconisations de Prunier et al (1991), et au printemps pour les inoculations des limbes et des bourgeons. Dans chacun des cas les inoculations ont été réalisées par apport d'une suspension bactérienne sur feuilles et bourgeons. Elles ont été réalisées à l'aide d'une souche pathogène (41A) identifiée par le CTIFL à Larnage (26) dans un verger d'abricotier et considérée comme la souche la plus pathogène actuelle travaillée (Lamichhane et al., 2014). Il s'agit d'un isolat de Pseudomonas syringae pv syringae. L'inoculum a été préparé par le

Mlle HADJ BRAHIM Mouna MATERIEL ET METHODES

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laboratoire de pathologie de l'INRA de Montfavet avec une concentration de 10⁸ UFC/ml.

Sur rameaux: les inoculations ont été réalisées le 16 décembre 2013 sur la population « BerBa » et le 18 décembre 2013 sur la collection à raison respectivement de 5 et 3 rameaux par génotype. Pour chaque génotype, un rameau supplémentaire a été inoculé avec de l'eau distillée et utilisé comme référence. L'inoculation a été réalisée suivant la méthode de Prunier et al (1991) qui consiste à introduire une goutte de 20 ul d'une suspension bactérienne titrée à 10⁸UFC/ml dans une plaie réalisée dans l'écorce du rameau jusqu'au cambium et à entourer la plaie avec du parafilm.

Sur feuilles : les inoculations ont été effectuées les 09 et 12 mars 2014 respectivement sur la collection et sur la population GoMo. Seize feuilles (4 rameaux x 4 feuilles) pleinement développées ont été inoculées par génotype en effectuant une perforation à l'aide d'une brosse en inox suivie d'une pulvérisation sur les deux côtés de chaque limbe à l'aide d'1 ml de suspension bactérienne titrée par pulvérisation. Trois semaines après inoculation, les feuilles ont été collectées, stockées rapidement au froid (+4°C), puis scannées pour la notation.