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Epidemiologie et caracterisation moleculaire de salmonella et shigella, chez les patients souffrants de diarrhée aiguë à  N'Djamena au Tchad


par N'gare Hassan Mahamat Tahir
Université de N'Djamena - Doctorat en Biologie 2025
  

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RESUME

Introduction

Dans les pays en voie de développement, les maladies infectieuses d'origine alimentaire, principalement attribuables aux genres Salmonella et Shigella, représentent un problème de santé majeur. Les Salmonella et Shigella, sont des espèces bactériennes les plus courantes impliquées dans divers types d'infections, y compris la septicémie et la gastro-entérite. Ceux-ci impliquent plusieurs clones bactériens présentant une résistance aux multimédicaments, ce qui les rend difficiles à traiter. L'objectif de notre étude était détecter les espèces de Salmonella et Shigella dans les échantillons pathologiques de selles et du sang, afin d'évaluer leur prévalence en relation avec les facteurs de risque, de caractériser leur profil de résistance face aux antibiotiques, et de reconstruire leur arbre phylogénétique pour comprendre leur origine.

Materiel et Methodes

Les échantillons ont été prélevés auprès de patients hospitalisés et de patients externes dans quatre hôpitaux de district à savoir : hopital de distrisctEst ,Hopital de District Centre , Hopital de district Sud, Hopital de district Nord ainsi qu'au Centre Hospitalier de la Mère et de l'Enfant, sur une période s'étendant de juin 2021 à décembre 2023. Les selles des patients du CHU ME ont été prélevées dans des flacons stériles, tandis que des écouvillons ont été utilisés pour les patients des hôpitaux de district de N'djamena. De plus, le sang des patients présentant une fièvre supérieure à 38 degrés Celsius a été utilisée pour l'hémoculture. Le test de sensibilité antimicrobienne a été réalisé à l'aide de la méthode CA-SFM /EUCAST et les souches ont été identifiées par des tests microbiologiques conventionnels.

L'ADN bactérien a été extrait par méthode d'ébullition. (GTG) -PCR a été utilisé pour le sous-typage de la souche. Le logiciel Dendro- UPGMA a été utilisé pour regrouper les souches à partir des empreintes génétiques obtenues par (GTG) -PCR.

Résultats et discussions

Un total de 1350 patients a été enregistré dans quatre hôpitaux de district ainsi qu'au Centre Hospitalier Universitaire de la Mère et de l'Enfant pour des cas de gastro-entérites aiguës.

cinquante(50) souches ont été isolées, dont trente (30)Shigella et vingt (20) Salmonella. Nous avons observé une différence significative dans l'incidence des infections bactériennes chez les enfants de 0 à 5 ans et les adultes de plus de 21 ans par rapport aux autres groupes (p = 0,01).

Les profils de sensibilité aux antibiotiques des souches Salmonella et Shigella étaient diversifiés : Salmonellaenterica et Shigellabongori. Nous avons constaté que 82,3 % des bactéries étaient résistantes aux antibiotiques de la famille des bêta-lactamines, notamment l'ampicilline, l'amoxicilline et l'amoxicilline + acide clavulanique, ainsi que la céftriaxone. La majorité des souches étaient sensibles à la gamme d'antibiotiques testée, notamment la quinolone (acide nalidixique, ofloxacine et ciprofloxacine), à l'exception de certains antibiotiques de la famille des bêtalactamases, qui ont montré une sensibilité réduite à l'ampicilline et à l'amoxicilline + acide clavulanique. Par ailleurs, pour évaluer les relations phylogénétiques et établir des liens épidémiologiques entre les souches de Salmonella isolées au cours de notre étude, nous avons caractérisé vingt isolats bactériens de Salmonella par PCR (Polymérase Chain Reaction) GTG5, puis regroupé les souches en utilisant le logiciel DendroUPGMA sur la base des empreintes génétiques obtenues par PCR GTG5.

Le den- drogramme obtenu à l'aide de l'empreinte génétique a permis de regrouper les souches de Salmonella en 20 groupes (G1 à G20).

Conclusion

Cette étude souligne l'ampleur du problème de santé publique posé par ces bactéries chez les populations tchadiennes. Elle met en évidence la nécessité de surveiller de près le profil antibiotique afin d'assurer une antibiothérapie efficace et de mettre en place des programmes de prévention adaptés à la santé publique. La circulation de telles souches nécessite des études plus poussées pour mieux connaitre l'origine et leur mode dissémination.

Le test Rep-PCR (GTG) a permis un typage moléculaire rapide des souches de Salmonella. Les souches des Salmonella typées dans cette étude appartiendraient à différents clones.

Mots clés : Diarrhée aigüe, Identification, Antibiotiques, épidémiologie, N'Djamena.

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