Memoire Online - Etude comparative entre quelques miels locaux et autres importés

Nous avons travaillé sur 9 échantillons de miel des années 2008 et 2009 provenant de différentes régions de la wilaya de Djelfa et 1 échantillon provenant de la région de la Mitidja et 4 autres échantillons des miels importés, à chaque échantillon, il à été attribué un code désignant :

	N° de l'échantillon	Date de récolte	Lieu de récolte	Origine florale présumée	Type d'extraction
Miels locaux	01	Aout 2008	Messâad (Oued Djdey)	Jujubier	Mécanique
	02	Avril 2009	Messâad (El gahera)	Toutes fleurs	Manuel
	03	Juin 2008	Amn Ouassara (Sersou)	Toutes fleurs	Mécanique
	04	Juin 2008	Amn el-bel	Toutes fleurs	Manuel
	05	Juin 2008	Amn Ouassara (Sersou)	Toutes fleurs	Mécanique
	06	Juin 2009	Messâad (Tamdit)	Toutes fleurs	Mécanique
	07	Juin 2009	Messâad (Mlaga)	Les épineux	Mécanique
	08	Juin 2009	Hassi bahbah	Toutes fleurs	Mécanique
	09	Mai 2009	Amn Ouassara (Sersou)	Toutes fleurs	Mécanique
	10	Juin 2009	Mitidja (Boufarik)	Les agrumes	Mécanique
Miels import&	11	Juin 2008	Espagne	Toutes fleurs	Mécanique
	12	Juin 2008	Arabie saoudite	Toutes fleurs	Mécanique
	13	Juin 2008	Inde	Toutes fleurs	Mécanique
	14	Juin 2008	Mali	Toutes fleurs	Mécanique

Nous avons adopté le protocole expérimental présenté au niveau de l'organigramme ci après :

Répartition en flacons et
conservation à l'abri de
l'humidité et de la
lumière

- Examen microscopique de la
présence des grains de pollen
(quantité), des différentes formes
de grains de pollen.
- Prise des photos

La densité est obtenue en calculant le quotient de la masse volumique d'un miel et de la même masse volumique d'eau distillée.

On pèse 5 mg d'eau distillée et on note le poids, également pour l'échantillon à analyser dont on note le poids aussi, La densité est exprimée par la relation:

Selon LOUVEAUX (1985), le pH est mesuré en solution dans l'eau à 10%, à l'aide d'un pH-mètre. (figure 7 et 8)

Le pH (ou potentiel hydrogène ou indice de Sorênsen) est défini comme le cologarithme de la concentration en ions H dans une solution. Pour le miel, c'est un indice de la « réactivité acide » du produit.

Le miel est mis en solution à 10 % dans l'eau distillée. Il suffit de plonger la pointe de l'électrode dans le liquide la valeur du pH s'affiche au potentiomètre au centième d'unité. Le pH-mètre doit être étalonné avant son utilisation à. l'aide des solutions tampons (de 7 et 4 par exemple).

Figure 7 : Préparation des Solutions du miel Figure 8 : Le pH-mètre utilisé

Selon LOUVEAUX (1985), la mesure de la conductibilité électrique se fait au moyen d'un conductimètre dans une solution de miel à 20 % de matière sèche (figure n° 9). On opère à 20°C. La mesure est rapide, mais la préparation de la solution exige une pesée précise et une mesure de la teneur en eau.

Cette méthode a pour objet de vérifier si la valeur de la conductivité électrique du miel analysé est compatible avec son appellation florale.

Pour la mesure de la conductibilité électrique, il suffit de préparer une solution à 20% de miel avec de l'eau distillée, puis plonge la pointe de l'électrode du conductimètre électrique.

La mesure de l'absorbance a été faite selon la méthode de la FAO (1969). Peser 5g de miel et dissoudre dans 100 ml d'eau distillée pour une solution de 5% de concentration. La mesure de l'absorbance est réalisée à l'aide d'un spectrophotomètre à 575 nm après avoir étalonner l'appareil avec de l'eau distillée.

Selon LOUVEAUX (1982), la mesure de la teneur en eau se fait très simplement au moyen d'un refractomètre. Le miel à analyser doit être parfaitement liquide.

La goutte de miel est déposée sur la platine du prisme d'un réfractomètre de type Abbé à thermomètre incorporé et répartie en couche mince. La lecture est faite à travers l'oculaire au niveau de la ligne horizontale de partage entre une zone claire et une zone obscure. Cette ligne coupe une échelle verticale graduée directement en pourcentage d'humidité dans le miel. La température du prisme est notée.

En se rapportant au Tableau de CHATAWAY (1932) (tableau n°6), nous obtenons le pourcentage d'eau correspondant à l'indice de réfraction à 20°C.

Grâce à la méthode de réfractométrie, on peut évaluer le taux de matière sèche.

La lecture est faite sur l'échelle qui indique la teneur en matière sèche ou degré brix qui se trouve en parallèle avec l'échelle de l'indice de réfraction.

Le dosage de protéine s'effectue selon la méthode de BIURET, en réalisant la gamme d'étalonnage à partir d'une solution étalon en SAB de 10g/L. (voir annexe n° 3)

A partir d'une solution de 10% de miel, 1 ml est versé dans un tube à essai, et on ajoute 4 ml de réactif de Gornall, on met le mélange dans une cuvette au spectrophotomètre réglé à une longueur d'onde X = 540 nm. Le spectrophotomètre doit être étalonné par une solution composée par 4 ml de réactif de Gornall et 1 ml d'eau physiologique (comme blanc).

A : absorbance, 2.163 : le coefficient de correction retiré à partir la courbe d'étalonnage.

L'acidité libre est obtenue en traçant la courbe de neutralisation du miel par une solution d'hydroxyde de sodium et la détermination du pH du point équivalent.

Pour cela, 5g de miel sont pesé et dissout dans quelques millilitres d'eau distillée et la solution est amenée à un volume de 50 ml dans une fiole jaugée. Avec une pipette, 25 ml sont prélevés et versés dans un bécher. Le liquide est agité à l'aide d'un agitateur magnétique puis dosé à l'aide d'un potentiomètre avec l'hydroxyde de sodium à 0,05 N. Le pH doit être noté immédiatement après chaque addition d'hydroxyde de sodium.

Lorsque les variations de pH deviendront minimes, pH compris entre 8,5 et 9, le volume de l'hydroxyde de sodium versé dans le bécher doit être calculé pour déterminer l'acidité libre.

L'acidité libre est exprimée en milliéquivalent d'hydroxyde de sodium nécessaire pour porter le pH au point équivalent E, pour 1000 grammes de miel.

V : le volume en milliéquivalents d'hydroxyde de sodium verse pour atteindre le pH du point équivalent (E) lors de la neutralisation du miel;

L'HMF est un dérivé de déshydratation des sucres ; qui apparaît par réaction chimique naturelle lors du vieillissement ou du chauffage des miels.

L'analyse a été effectuée selon la méthode de WINKLER parue dans le rapport de la commission international du miel (2002). Cette mesure de la teneur en HMF est basée sur la mesure de l'absorbance de cette molécule par spectrophotométrie réglée à une longueur d'onde de 550nm, en présence d'acide barbiturique et de la paratoluidine.

Dans une fiole jaugée de 100 ml, on dissout 500 mg d'acide barbiturique dans 70 ml d'eau distillée au bain marie, on refroidit et en complète avec de l'eau distillée jusqu'au trait de jauge.

Dans une fiole jaugée de 250 ml, on dissout 25 g de paratoluidine dans 50 ml de isopropanole, on ajoute 25 ml d'acide acétique cristallisable puis on complète jusqu'au trait de jauge avec le isopropanole.

Laisser la solution de paratoluidine à l'obscurité 24 heures avant son utilisation. Dissoudre 2 g de miel dans 10 ml d'eau distillée (2tubes par échantillon).

Essai Réactifs	Tube d'essai	Tube témoin
Solution de miel	1 ml	1 ml
Réactif de la paratoluidine à 10%	2,5 ml	2,5 ml
Solution d'acide barbiturique à 0,5%	0,5 ml	-
Eau distillée	-	0,5 ml

La préparation du tube à essai ne doit pas dépasser deux minutes. Expression des résultats :

L'absorbance d'essai est mesurée par rapport au blanc à 550 nm dans les trois à quatre minutes en maximum.

La teneur en HMF est exprimée en mg pour 1 kg de miel, elle est donnée par la formule suivante :

192 : facteur de dilution et coefficient d'extinction, obtenue expérimentalement à partir de l'HMF pur. A : absorbance.

L'analyse pollinique des miels donne une information précise sur les principales plantes mellifères et permet de caractériser les miels par leur origine botanique ou géographique. Elle apporte des informations importantes sur le comportement de butinage des abeilles. Par ailleurs, la teneur en pollen des miels permet de contrôler leur qualité, augmentant ainsi leur valeur économique.

Nous avons utilisé la méthode classique donnée par LOUVEAUX et al. (1970), 10 g de miel (pesés exactement à 0,1 g près) sont dissous dans 20 ml d'eau chaude (ne pas dépasser 40 °C). La solution obtenue est centrifugée pendant cinq minutes et le liquide restant est séparé du sédiment; le liquide peut être versé ou aspiré. Pour une meilleure élimination des sucres du miel il est recommandé de reprendre le dépôt par 10 ml d'eau distillée, de le transvaser dans un tube à centrifugation plus petit et de centrifuger à nouveau pendant cinq minutes.

On porte le dépôt (au moyen d'une anse de platine ou d'une fine baguette de verre), autant que possible de façon quantitative, sur une lame porte-objet et on le répartit sur une surface d'environ 20 X 20 mm.

Après séchage (plus avantageusement à la chaleur mais sans excéder 40 °C) on l'inclut dans la glycérine-gélatine et on recouvre d'une lamelle. La glycérine-gélatine est préalablement liquéfiée au bain- marie à 40 °C (MAURIZIOU, 1970).

La détermination de l'origine géographique et de l'origine botanique repose sur l'identification des pollens et des autres constituants du sédiment d'un miel ainsi que sur leur dénombrement. L'identification se fait avec l'aide des données tirées des publications spécialisées comme ceux de Mm NAAS. O (2006), et au moyen de préparations de comparaison. (Voir les figures 11 à 15)

Dans l'analyse statistique nous sommes basé sur l'analyse de la variance (ANOVA), à travers cette analyse, nous avons essayé de comparer entre les différents échantillons du miel, ainsi entre les miels locaux et les introduits.

Lors de cette analyse, nous avons établi le test de NEWMAN-KEULS, qui est un test de comparaison de moyennes par paires, pratiqué à l'issue d'une ANOVA. (Annexe n°2)

Etude comparative entre quelques miels locaux et autres importés

Partie

Chapitre. IV. Matériels et méthodes