II.3.2 Capacité de rétention d'eau
Principe
Il est basé sur les différences de masses entre
les échantillons non centrifugés et les échantillons
centrifugés.
Mode opératoire (JAUREGUI et
al; 1981),
Une masse de 0,5 g d'échantillon
blanchi aux températures de 60° C ou de 95° C pendant 20,30,
45, 55 et 60 secondes a été pesée et enveloppée
dans du papier filtre Whatman n° 3. Elle est ensuite
centrifugée à 3000 tr/mn puis pesée à nouveau. La
quantité d'eau expressive est donnée par la formule
suivante :
(Masse échantillon non centrifugé) - (masse
échantillon centrifugé)
Masse échantillon non centrifugé
% d'eau expressible = x 100
II.3.3 Détermination de la teneur en
-Carotène
II. 3.3.1 Extraction du -Carotène
Principe
L'extraction se fait à froid, par différence de
solubilité dans un mélange de solvants des phases non miscibles
contrastées. Grâce aux interactions entre molécules
polaires et entre molécules non polaires. Les molécules peu
polaires seront dissoutes dans l'éthanol et les molécules
apolaires dans l'hexane.
Mode opératoire (SIMPSON et al,
1987)
Une masse d'igname, environ 1g est introduit dans un mortier
contenant du sable fin. Après ajout de 10 ml de solvant d'extraction
hexane/acétone (1 : 1 ; v/v), l'ensemble est
homogénéisé. L'homogénat est filtré et le
résidu obtenu est repris 3 fois dans 5 ml de solvant d'extraction. Les
filtrats sont mélangés, puis décantés à
l'aide d'une ampoule à décanter. La phase organique est
recueillie et lavée dans 50 ml d'eau déminéralisée.
L'opération est reprise 3 fois de suite. La phase organique obtenue est
déshydratée à l'aide du sulfate de sodium anhydre (1
pincée). Lors de la manipulation, la verrerie est enveloppée
à l'aide du papier aluminium pour minimiser la dégradation du
-Carotène sous l'effet de la lumière.
II.3.3.2 Elution (Chromatographie sur colonne)
Principe
L'élution du -Carotène est effectuée sur
colonne chromatographique contenant du gel de silice, en utilisant comme
colonne une burette au fond de laquelle on a introduit du coton. Les
molécules sont entraînées vers le bas à des vitesses
variables selon leur affinité pour l'absorbant et leur solubilité
dans l'éluant.
Mode opératoire
Pour préparer la colonne à gel de silice, une
masse de silice est prélevée et suspendue dans l'hexane pour
former un gel. La colonne est tassée avec le gel obtenu jusqu'à
une hauteur de 10 cm environ. Une couche d'environ un cm de sulfate de sodium
anhydre y est ajoutée. Pour l'élution proprement dite, la phase
organique est ajoutée à la colonne puis éluée avec
30 ml de solvant hexane / acétone (9 : 1 ; V/V). Des fractions
de 5 ml chacune sont recueillies dans des bouteilles en verre de couleur
marron. Les D O sont lues à 450 nm contre l'hexane.
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