Variation de Poids
(V.P)
Poids maximal-Poids moyen
Ecart (+) = --------------------------------------x 100
Poids moyen
Normes : Comprimés : PM<140 mg=>
VP = + 10 %
PM (140-300 mg) => VP = + 7 %
PM> 300 mg => + 5%
I.4 Mode opératoire de l'analyse par CCM
d'adsorption
I.4.1. Préparation de la phase
stationnaire
A partir d'une plaque à base de Silicagel G254 20x20cm,
des morceaux de 5x10cm ont été découpés. Nous avons
apprêté ces plaques en traçant deux lignes
parallèles et horizontales, l'une à 1,5 cm du bord
inférieur et l'autre à 1 cm du bord supérieur de la
plaque.
Les points de dépôt d'échantillons sur la
plaque ont été séparés de 1 cm en prenant soin de
laisser 1 cm aux extrémités de chaque plaque.
Les détails relatifs à la préparation des
plaques chromatographiques sont montrés par la figure 1.
Les plaques de chromatographie sur couche mince ainsi
apprêtées sont soumises à l'activation de l'adsorbant en
les chauffant légèrement sur une plaque chauffante à 100
°C. Elles deviennent ainsi prêtes à recevoir les
dépôts d'échantillons à analyser.
1cm 1 cm
10 cm
1,5 1,5cm
5cm
Figure 1 :
Représentation d'une plaque de CCM
I.4.2 Préparation des
échantillons
A partir de la poudre fine des comprimés
d'artésunate (pulvérisée au mortier) de chaque lot
à évaluer, une prise d'essai d'environ 1mg d'artésunate
est dissoute dans 3ml d'alcool, après agitation 7ml d'alcool sont
ajoutés. (à dissoudre plutôt dans 2ml de
méthanol) ??
Après agitation et filtration, le filtrat
collecté est évaporé et le résidu repris par 10ml
de toluène. La solution ainsi obtenue est utilisée pour le
dépôt d'échantillon sur la plaque à chromatographie
sur couche mince.
La matière première d'artésunate a servi
de témoin. En effet, 1mg de poudre dissoute dans 10ml de toluène
a donné une solution qui a été utilisée comme
étalon dans le développement chromatographique.
I.4.3. Préparation de la phase
mobile et saturation de la chambre chromatographique
La phase mobile était constituée du
mélange Toluène/Acétate d'éthyle/Ethanol dans les
proportions 6 :3 :1.
Les différentes cuves chromatographiques utilisées
dans notre étude ont été soigneusement lavées et
séchées. Elles ont ensuite été bien rincées
au préalable et saturées avec la phase mobile pendant au moins
deux heures en les fermant hermétiquement.
I.4.4. Préparation du
révélateur à base de vanilline
La solution utilisée comme révélateur est
préparée comme suit : peser 1g de vanilline en poudre et le
placer dans un ballon jaugé de 100ml. Ajouter quelques millilitres
(environ 20 ml) d'éthanol pour la dissolution et porter au volume avec
de l'éthanol. Enfin, ajouter goutte à goutte 2 ml d'acide
sulfurique concentré.
La solution ainsi obtenue ne peut être utilisée
que dans les 48 heures qui suivent sa préparation.
I.4.5. Développement
chromatographique
Sur les plaques de Silicagel préparées, nous
avons déposé 4 ul des solutions des échantillons aux
points indiqués et à l'aide des microcapillaires de 1ul et 2ul
(c'est-à-dire on spot quatre fois de suite ou deux fois de suite) les
différents échantillons.
Après un temps de séchage, les plaques ont
été placées dans les chambres chromatographiques
préalablement saturées pour leur développement.
A la fin du développement (fin de la migration), les
plaques ont été retirées de la chambre chromatographique,
puis séchées à l'air libre pendant 15 minutes.
I.4.6. Révélation des spots
après développement chromatographique
La révélation des substances analysées se
fait en pulvérisant sur les plaques développées
préalablement séchées, la solution du
révélateur (vanilline dans l'éthanol et acide sulfurique).
Puis, on expose les plaques à la chaleur (à l'étuve ou
à une plaque chauffante) pendant 3 à 5 minutes.
Il se développe une coloration rouge en présence
de l'artésunate ou d'un autre dérivé de
l'artémisinine.
CHAPITRE II. RESULTATS ET DISCUSSIONS
II.1 RESULTATS
Les échantillons des comprimés
d'artésunate collectés ont fait l'objet de développement
chromatographique en vue de l'évaluation de la stabilité chimique
du principe actif par la recherche des produits de dégradation dans nos
conditions opératoires.
Avant de procéder au développement proprement
dit, quelques essais ont permis d'apprécier la qualité
pharmacotechnique des comprimés, notamment la détermination du
poids moyen et des variations des poids. Les résultats de ces
déterminations sont repris dans le tableau II
Tableau II : Poids moyen et variation de poids
des comprimés des échantillons collectés
|
N°
|
Dénomination
|
N° de Lot
|
Poids moyen
|
Variation de poids
|
|
1
|
ARSUCAM® (7 à 13
ans)
|
081
|
275,5 mg
|
-1,633% à +1,758%
|
|
2
|
ARSUCAM® (7 à 13
ans)
|
082
|
273,33 mg
|
-1,763% à +1,876%
|
|
3
|
ARSUCAM® (7 à 13
ans)
|
075
|
272,42 mg
|
-1,361% à +2,129%
|
Quant à la CCM, dans nos conditions opératoires,
l'identité de l'artésunate contenue dans les comprimés a
été confirmée sur les chromatogrammes
développés pendant plus d'une année d'étude. En
effet, ainsi que le montre les résultats consignés dans le
tableau III, les échantillons testés ont montré les
mêmes Rf que les solutions d'artésunate utilisées comme
témoin.
Tableau III : Rf des échantillons
collectés par rapport aux témoins en fonction du
temps
|
N°
|
Dénomination
|
N° de lot
|
Rf Témoin
|
Rf Echantillon
|
|
1
|
ARSUCAM® (7 à 13
ans)
|
081
|
|
|
|
2
|
ARSUCAM® (7 à 13
ans)
|
082
|
|
|
|
3
|
ARSUCAM® (7 à 13
ans)
|
075
|
|
|
| 
