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Caractérisation génomique des bactériophages isolés en Côte d’Ivoire.


par Aboubacar SYLLA
Université Felix HOUPHOUET- BOIGNY - Master 2 biotechnologies-biosécurité 2017
  

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Introduction

L'utilisation des phages comme thérapie nécessite plusieurs étapes de caractérisation biologique et génomique . Après l'isolement et la purification des phages, le matériel génétique est extrait afin de réaliser le typage moléculaire par l'utilisation des enzymes de restrictions dans le but de vérifier le type de matériel génétique, la technique d'électrophorèse en champs pulsé (PFGE en anglais) pour voir le profil génomique, la PCR et le séquencage pour étudier les gènes par comparaison avec d'autres séquences d'ADN , le séquencage du génome complet par la technique la technique de Next Generation Sequencing (NGS), etc.

En Côte d'Ivoire, la phagothérapie n'est pas utilisée comme thérapie et reste méconnue par le corps médical professionnel (Ehui et al., 2017). Plusieurs études récentes ont mis en évidence l'isolement de phages lytiques à potentiel thérapeutique en Côte d'Ivoire (Essoh et al., 2015 ; Ngazoa-Kakou et al., 2017) mais aucune application n'a été explorée. Vue l'émergence des bactéries et bactéries multi-resistantes dans l'environnement (Baguy, 2014), la sélection et la caractérisation de phages candidats potentiels en faveur de la phagothérapie et la mise en place des biocollections de phages lytiques en Cote d'Ivoire devient une nécessité et une urgence scientifique.

Aujourd'hui, grâce à la biologie moléculaire et au séquençage du génome viral, on peut rapidement éliminer les phages contenant des séquences génomiques potentiellement dangereuses (gènes de toxines, gènes de virulence, gène de résistance aux antibiotiques etc.) (Gorski et al., 2009).

Aussi, ce travail se propose comme objectif général de :

Déterminer le profil génomique de quelques phages isolées en Côte d'Ivoire, et comme objectifs spécifiques de :

? Déterminer le type de matériel génétique après digestion enzymatique suivie d'une électrophorèse,

? Estimer la taille du génome par analyse du profil génomique via la technique de l'électrophorèse en champ pulsé (PFGE).

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Revue bibliographique

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Revue bibliographique

1. Bactériophages

1.1. Définition

Les bactériophages, communément appelés phages sont des parasites obligatoires n'ayant aucune activité biochimique à l'extérieur d'une cellule et n'infectent que les bactéries (Ackermann et DuBow, 1987 ; Kutter et Sulakvelidze, 2005). Ils sont généralement spécifiques à une espèce bactérienne voire à juste certains individus de cette espèce. Mais, plusieurs bactériophages peuvent être spécifiques d'une même bactérie (Sulakvelidze, 2011).

Bien que parasites obligatoires, constitués d'un acide nucléique (ADN ou ARN) et de protéines, comme tous les virus, ce ne sont pas des êtres vivants au sens strict, mais des entités biologiques (Drouji, 2009).

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