3 APTITUDE A L'ORGANOGENESE
3.1Aptitude à la rhizogenèse
3.1.1 Influence de la composition hormonale du milieu
3.1.2 Influence de l'explant
3.1.3 Influence du génotype
3.1.4 Conclusion
3.2 Aptitude à la caulogenèse
3.2.1 Description morphologique
3.2.2 Amélioration de l'induction de la
caulogenèse
3.2.2.1 Influence de la composition hormonale du
milieu
3.2.2.2 Recherche d'explants plus performants
3.2.2.3 Recherche d'un génotype
3.2.2.4 Etude des interactions de l'explant , du
génotype et la composition hormonale du milieu
3.2.2.4.1- Influence de l'origine
génétique des explants sur la caulogenèse
3.2.2.4.2 Conduite des explants en fonction de la
composition hormonale
3.2.2.4.3 Aptitude caulogène des différents
génotypes en fonction de la composition hormonal
3.2.2.4.4 Etude de l'Interaction ( Explant,
Génotype et de la composition hormonale du milieu).
3.2.2.5 Influence de la source carbonée
3.2.3 Conclusion
3.2.4 Enracinement et transplantation
3.2.5 Apparition de structures particulières
4 APTITUDE A L'EMBRYOGENESE SOMATIQUE
4.1 Description morphologique des embryons somatiques
4.2 Amélioration de l'induction de
l'embryogenèse somatique
4.2. 1 Influence de la composition hormonale du
milieu
4.2.2 Recherche de l'explant le plus performant
4.2.3 Effet du génotype
4.2.4 Etude des interaction de l'explant , du
génotype et de la composition hormonale du milieu
4.2.4.1 Influence de l'origine
génétique des explants
4.2.4.2 Conduite des explants en fonction de la
composition hormonale
4.2.4.3 Aptitude embryogène des
différents génotypes en fonction de la composition hormonale
4.2.4.4 Interaction de la composition hormonale du milieu ,du
génotype et de l'explant
4.2.5 Influence de la source carbonée.
4.3 Germination des embryons somatiques
4.4 Conclusion
5 DISCUSSION ET CONCLUSION GENERALE
CHAPITRE I GENERALITE SUR LES CULTURES
IN-VITRO
1 - APERCU HISTORIQUE SUR LES TECHNIQUES DE CULTURES
IN-VITRO.
La multiplication in-vitro trouve son fondement dans
le concept de " totipotence cellulaire " énoncé au début
du siècle : la cellule, unité morphologique et physiologique de
l'être vivant ,est capable d'autonomie . Elle possède toute
l'information génétique nécessaire à
régénérer la plante entière, à condition
bien sûr de créer les conditions favorables à ce
développement . Ce concept énoncé des 1902 par HABERLANDT
, ne sera finalement démontré par STEWARD et son équipe
qu'en 1958 , lorsque ces chercheurs obtiendront les premiers " embryons
artificiels" appelés " embryons somatiques" à partir de cellules
de carotte qui évolueront par la suite en jeunes plantules(ZRYD, 1988;
MARGARA, 1989; AUGE et al.,1989; BOXUS,1995 TOUTE,1998).
En effet le botaniste HABERLANDT fut le premier, en 1902,
à définir exactement le problème de la culture des tissus
et l'a tenter avec des fragments de plantes très diverses Il obtenait
une survie des cellules de quelque mois mais jamais de multiplication (SCHMID
et KELLER,1981) .
En 1934 GAUTHERET eut l'idée d'utiliser le tissu
cambial des arbres. Il avait aussi trouvé le matériel
idéal mais pas encore le milieu nutritif optimal. Ce n'est qu'en 1932
que WHITE aux Etats - Unis obtint des cultures indéfinies de cellules
de tabac. Au même moment GAUTHERET et NOBECOURT publiaient leur
résultats sur la culture indéfinie de tissus de carotte
(TOUTE,1998) .
Le succès fut assuré lorsque, on commença
à ajouter au milieu de culture de l'auxine. En 1946, partant d'apex, BAL
aux USA obtient quelques plantes de lupin. Tandis que WETMORE et MOREL
régénèrent des fougères en 1949. A la même
époque l'équipe de LIMASSET et CORNUET en France
démontrent l'absence de particules virales dans les apex de tabac
(ZRYD,1988).
Ces dernières observations ont été mises
à profil, vers les années 1952, par MOREL et MARTIN qui ont
réussi à obtenir, par culture in-vitro de
méristèmes, des plantes saines (indemnes de viroses ) à
partir de dahlia (CHEVRE,1985).
L'année 1955 été marqué par la
découverte de la Kinétine par SKOOG (substance dotée d'un
grand pouvoir caulogène) a permis de provoquer, presque à
volonté, la néoformation de bourgeons adventifs qui,
traités par de l'acide gibbérellique et des auxines,
s'enracinaient pour donner des plantes entières(TOUTE,1998).
En 1958, STEWARD et son équipe
régénèrent les premiers embryons dits somatiques à
partir de cellules de carotte et confirment que certaines plantes
développées à partir de culture de cellules sont issues
d'embryogenèse asexuée. Dès lors, les expériences
s'accumulèrent avec des plantes aussi diverses que le tabac, la
carotte, le trèfle, le pois, le soja,....etc (SCHMID et KELLER ,1981;
MARGARA,1989; TOUTE,1998).
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