2.2.10. Fibres brutes
Les fibres ont été déterminées
selon la méthode de Weende (Multon, 1991). Une masse
(P1) de 1 g (MS) contenu dans un ballon est portée à
ébullition pendant 1 h sur une lampe rampante (LABCONCO, 64132,
Kansas City, USA) dans laquelle 3 gouttes d'acide octanoïque et
100 mL de solution de détergent neutre (150 g de sodium lauryl sulfate +
93,05 g d'EDTA + 34,05 g de sodium borate décahydrate + 22,8 g de
phosphate de sodium anhydre + 50 mL de triéthylène glycol dans 5
mL d'eau distillée) sont ajoutées. L'hydrolysat obtenu a
été lavé par filtrage avec 30 mL d'eau chaude (95 °C)
puis 10 mL d'acétone dans un creuset de Gooch de masse connue (P0).
L'ensemble creuset de Gooch et filtrat ainsi obtenu a été
séché à 105 °C pendant 24 h puis pesé (P2)
pour la détermination des fibres brutes suivant l'équation 11.
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P2 - P0
Fibres brutes (%) = (P1 ) X 100
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Equation 11
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P0 : masse (g) du creuset ;
P1 : masse (g) de l'échantillon, P2 :
masse (g) (filtrat + creuset)
KOUAKOU Koffi Jean-Michel/Mémoire Master 2
BTA/ UFR STA/ Année universitaire 2015-2016
2.2.11. Sucres réducteur
La teneur en sucre réducteur est
déterminée selon la technique décrite par (Miller,
1959) utilisant l'acide 3,5-dinitro-salicylique (DNS). La
préparation du DNS consiste à mélanger 2 g de DNS dans 40
mL d'eau et3,2g de NaOH dans 30mL d'eau distillée. Puis 60 g de tartrate
de potassium et de sodium sont ajoutés lentement, sous agitateur
chauffant et tout est amené à 200 mL avec de l'eau
distillée. Le dosage des sucres réducteurs est effectué
comme suit :
Dans un tube à essai contenant 1 mL de DNS est
ajouté 1 mL de filtrat de farine préalablement dilué (1/10
dans de l'eau distillée). L'ensemble est
homogénéisé et porté au bain marie bouillant
pendant 5 minutes. Ensuite, 2 mL d'eau distillée sont ajoutés au
milieu pendant le refroidissement. La lecture de la densité optique au
spectrophotomètre (BETASL, FUSE TYPE T) s'effectue à 540 nm
contre un tube témoin ne contenant pas d'extrait sucré. Le tube
témoin contient à la place de 1 mL de filtrat de farine, 1mL
d'eau distillée. Le dosage des solutions standard de glucose se fait de
la même manière en utilisant à la place du filtrat de
farine,1mL de chaque dilution de la solution mère de glucose. (0,1 mg/mL
; 0,2 mg/mL ; 0,25 mg/mL ; 0,3 mg/mL ; 0,35 mg/mL ; 0,4 mg/mL ; 0,5 mg/mL ; 0,6
mg/mL ; 0,7 mg/mL ; 0,8 mg/mL). La courbe d'étalonnage
déterminée a permis de calculer les concentrations en sucre
réducteurs des échantillons de filtrat de farine.
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Expression de la teneur en sucre
réducteurs
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X (g /100mL) = (1mg x Y x 0,001g x 100) / (1mL x 0,1796 x
1mg)
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Equation 12
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X= quantité de sucres réducteurs pour 100 mL de
filtrat de farine
Y= densité optique du matériel biologique lue
à 450 nm au spectrophotomètre
? Le pourcentage de perte de composés nutritionnels et
antinutritionnels dans les grains de haricot après cuisson est
donné par l'équation 13
Equation 13
20
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Pourcentage de perte =
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Teneur avant cuisson - Teneur après cuisson Teneur avant
cuisson
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X 100
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KOUAKOU Koffi Jean-Michel/Mémoire Master 2
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